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本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及人源Tsg101?Vps28?Vps37?Mvb12A四元復(fù)合物的制備方法及應(yīng)用。通過分別針對人源Tsg101、Vps28、Vps37和Mvb12A設(shè)計(jì)截短體；獲取組成人源ESCRT?I復(fù)合物的四種亞基的截短體編碼序列片段；分別克隆至昆蟲表達(dá)載體并轉(zhuǎn)化DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞獲得重組Bacmid桿粒；將四種重組桿粒分別轉(zhuǎn)染sf9昆蟲細(xì)胞產(chǎn)生重組桿狀病毒并擴(kuò)增至P2代病毒儲液，將四種P2代病毒等比例感染sf9細(xì)胞進(jìn)行目的蛋白表達(dá)；經(jīng)層析純化獲得人源ESCRT?I四元復(fù)合物。該復(fù)合物為解析ESCRT?I復(fù)合物結(jié)構(gòu)及闡釋ESCRT?I復(fù)合物介導(dǎo)膜出芽機(jī)制奠定基礎(chǔ)。

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