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本發(fā)明公開了一種人類和其他哺乳動物細胞附著體表達載體、表達系統、制備方法和應用，屬于基因工程與基因治療技術領域。該附著體表達載體上插入有如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的分段β?干擾素MAR序列(或者與該序列95％以上同源的核苷酸序列)，相較包含全長MAR序列或387bp MAR序列的表達載體，該載體能高效、持續(xù)、穩(wěn)定地表達外源目的基因，尤其是包含E段MAR序列的載體表達最佳，可用于基因治療。在該載體中，分段MAR序列插入載體的多克隆位點也即eGFP下游處，一方面能克服轉基因沉默，另一方面能提高目的蛋白的表達水平以及后續(xù)單克隆細胞株篩選的有效性。

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