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本發(fā)明涉及一種提高CHO細(xì)胞重組蛋白表達(dá)水平的方法及其應(yīng)用，表達(dá)載體、表達(dá)系統(tǒng)及其制備方法，屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明中的方法應(yīng)用CHO細(xì)胞內(nèi)源miRNAs與3′?UTR轉(zhuǎn)錄區(qū)互補(bǔ)結(jié)合來(lái)對(duì)篩選標(biāo)記基因表達(dá)進(jìn)行負(fù)性調(diào)節(jié)，進(jìn)而提高目的基因的表達(dá)量。將miRNAs與3′?UTR轉(zhuǎn)錄區(qū)克隆到篩選標(biāo)記基因的下游，構(gòu)建真核表達(dá)載體；然后將目的基因克隆到真核表達(dá)載體獲得重組表達(dá)載體，然后將其轉(zhuǎn)染細(xì)胞，獲得CHO細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)目的基因的高效表達(dá)。本發(fā)明的CHO細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)，可以顯著提高目的基因在CHO細(xì)胞中的表達(dá)水平，實(shí)現(xiàn)目的蛋白在CHO細(xì)胞的高產(chǎn)量穩(wěn)定表達(dá)。

1、選定專利：顧問(wèn)一對(duì)一服務(wù)，幫助買(mǎi)家選中所需專利，并確認(rèn)賣(mài)家專利可交易；

2、簽訂合同：買(mǎi)賣(mài)雙方與顧問(wèn)協(xié)商交易細(xì)節(jié)，簽訂合同；

3、支付款項(xiàng)：買(mǎi)家依合同約定支付交易款項(xiàng)到運(yùn)營(yíng)平臺(tái)；

4、提供材料：買(mǎi)賣(mài)雙方需要提供《專利代理委托書(shū)》、《轉(zhuǎn)讓協(xié)議》、《解聘書(shū)》等材料給辦理轉(zhuǎn)讓手續(xù)方；

5、辦理手續(xù)：辦理轉(zhuǎn)讓手續(xù)方提交材料至國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局辦理轉(zhuǎn)讓手續(xù)，國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局最快半個(gè)月左右下發(fā)專利轉(zhuǎn)讓《手續(xù)合格通知書(shū)》；

6、證書(shū)交接：買(mǎi)家確認(rèn)收到《專利證書(shū)》、專利轉(zhuǎn)讓《手續(xù)合格通知書(shū)》原件，確認(rèn)無(wú)誤。

7、交易完成：平臺(tái)把交易款項(xiàng)支付給賣(mài)家，至此專利轉(zhuǎn)讓業(yè)務(wù)完成。

保障一：對(duì)于在本平臺(tái)交易的交易品，均由我平臺(tái)驗(yàn)證交易品的有效性；

保障二：客戶通過(guò)本平臺(tái)交易，由我平臺(tái)核實(shí)并確保買(mǎi)賣(mài)雙方身份信息真實(shí)有效；

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保障四：通過(guò)本平臺(tái)交易，由我平臺(tái)代辦國(guó)家手續(xù)，辦理過(guò)程公開(kāi)透明，進(jìn)度隨時(shí)查詢，確保交易真實(shí)可靠。